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本產(chǎn)品僅供科研實驗，不得用于醫(yī)療或食用
| 產(chǎn)品名稱： | 人乙酰肝素酶(HPA)ELISA試劑盒 | ||||
| 產(chǎn)品英文名稱： | Human Heparanase,HPA ELISA kit | ||||
| 產(chǎn)品規(guī)格： | 96T/48T | ||||
| 產(chǎn)品用途： | 科研實驗 | ||||
| 保存條件： | 2-8℃ | ||||
| 有效期： | 6個月 | ||||
| 人乙酰肝素酶(HPA)ELISA試劑盒 | |||||
| 組成 | |||||
| 1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 7 終止液 6ml×1 瓶 | |||||
| 2 酶標(biāo)試劑 6ml×1 瓶 8 標(biāo)準(zhǔn)品（96μmol/L） 0.5ml×1 瓶 | |||||
| 3 酶標(biāo)包被板 12 孔×8 條 9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1 瓶 | |||||
| 4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶 10 說明書 1 份 | |||||
| 5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 張 | |||||
| 6 顯色劑B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 個 | |||||
| 標(biāo)本要求 | |||||
| 1．標(biāo)本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能 | |||||
| 馬上進行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融 | |||||
| 2．不能檢測含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。 | |||||
| 人乙酰肝素酶(HPA)ELISA試劑盒 | |||||
| 操作步驟 | |||||
| 1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀 | |||||
| 釋。 | |||||
| 48μmol/L 5 號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | |||||
| 24μmol/L 4 號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | |||||
| 12μmol/L 3 號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | |||||
| 6μmol/L 2 號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | |||||
| 3μmol/L 1 號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | |||||
| 2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、 | |||||
| 待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl， | |||||
| 然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5 倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡 | |||||
| 量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。 | |||||
| 3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。 | |||||
| 4. 配液：將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用 | |||||
| 5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30 秒后棄去，如此 | |||||
| 重復(fù)5 次，拍干。 | |||||
| 6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。 | |||||
| 7. 溫育：操作同3。 | |||||
| 8. 洗滌：操作同5。 | |||||
| 9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色 | |||||
| 10 分鐘. | |||||
| 10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。 | |||||
| 11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應(yīng)在加終止 | |||||
| 液后15 分鐘以內(nèi)進行。 | |||||
| 人乙酰肝素酶(HPA)ELISA試劑盒 | |||||
| 計算 | |||||
| 以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD 值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的 | |||||
| OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD 值計算出標(biāo) | |||||
| 準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD 值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)， | |||||
| 即為樣品的實際濃度。 | |||||
| 注意事項 | |||||
| 1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未 | |||||
| 用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。 | |||||
| 2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。 | |||||
| 3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間 | |||||
| 控制在5 分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。 | |||||
| 4． 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD 值 | |||||
| 大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測定，計 | |||||
| 算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。 | |||||
| 5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 | |||||
| 6．底物請避光保存。 | |||||
| 7．嚴(yán)格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn). | |||||
| 8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。 | |||||
| 9．本試劑不同批號組分不得混用。 | |||||
| 保存條件及有效期 | |||||
| 1．試劑盒保存：；2-8℃。 | |||||
| 2．有效期：6 個月 | |||||
| 人乙酰肝素酶(HPA)ELISA試劑盒 | |||||
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