RNAwait非凍型組織RNA保存液樣品處理的方法

RNAwait是一種液態(tài)的，無毒的組織RNA保存試劑，能迅速滲入組織抑制RNAase，穩(wěn)定并保護(hù)組織樣品中的RNA。本產(chǎn)品應(yīng)用范圍廣，適用于多種動(dòng)物組織（如肝臟、腦、肺、脾臟、腎臟、肌肉組織等），還可用于酵母、細(xì)菌、真菌、細(xì)胞以及某些植物樣品的RNA保存。經(jīng)RNAwait浸潤的組織或細(xì)胞，可在37℃保存1天，室溫保存1周，4℃保存4周，-20℃/-80℃長期保存。本產(chǎn)品幾乎兼容所有的RNA分離方法，如Trizol法、離心柱法和磁珠純化法等。

操作指南

1. 樣品處理

1) 動(dòng)物組織樣品：將組織剪切成長寬高均不大于0.5厘米的組織塊，迅速加入5-10倍體積的RNAwait。注意如骨頭等液體滲透性較弱的組織，不適合用本品進(jìn)行RNA保護(hù)。

2) 細(xì)胞樣品：收集細(xì)胞沉淀，用PBS洗滌后，5000g離心1-2分鐘，吸除PBS后小心加入5-10倍體積的RNAwait，避免吹起細(xì)胞。

3) 細(xì)菌樣品：12000g離心2min，棄上清加入5-10倍體積RNAwait試劑，對酵母和真菌樣品進(jìn)行保存時(shí)，請參考細(xì)菌處理方法。

2. 樣品保存

1) 浸透于RNAwait試劑中的樣品在37℃可保存一天，室溫保存一周，4℃保存一個(gè)月。

2) -20℃保存方法：樣本4℃浸透過夜，然后轉(zhuǎn)移至-20℃長期保存，RNAwait試劑不會(huì)在-20℃凍結(jié)，但有可能出現(xiàn)結(jié)晶。可直接放在室溫融化，不會(huì)影響RNA的提取量和完整性。

3) -80℃保存方法：樣本4℃浸透過夜，然后轉(zhuǎn)移至-80℃長期保存（建議樣品在轉(zhuǎn)移至-80℃前將其從RNAwait中取出，直接凍于-80℃保存）。樣本可直接放在室溫融化，再重新凍上，不會(huì)影響RNA的提取量和完整性。

3. RNA提取

4) 組織樣品：用干凈的鑷子從RNAwait中取出組織塊，吸水紙吸掉表面液體，之后立即置于裂解液中勻漿或液氮中研磨。

5) 細(xì)胞和細(xì)菌等樣品：加入與RNAwait等體積的DEPC處理水，10000g離心1min收集樣品，小心去除上清，后續(xù)即可用各種方法提取RNA。酵母和真菌參考本方法提取RNA。

注意事項(xiàng)

1、本產(chǎn)品除保護(hù)RNA外，也可保護(hù)樣品中的DNA和蛋白質(zhì)的，但會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性，不適用于天然蛋白質(zhì)的提取。

2、本產(chǎn)品僅適用于新鮮組織樣品或細(xì)胞樣品。不可用于冰凍組織或細(xì)胞。

3、經(jīng)本產(chǎn)品保存的樣品，會(huì)變得微硬，為正常現(xiàn)象。

4、本產(chǎn)品存放過程中可能會(huì)出現(xiàn)沉淀，使用前放到37℃水浴中加熱，沉淀溶解后不影響使用。

5、為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。