三磷酸腺苷ATP含量測(cè)定試劑盒真的太棒了！

產(chǎn)品說(shuō)明：

三磷酸腺苷（adenosine 5'-triphosphate，ATP）是生物體內(nèi)能量轉(zhuǎn)換zui基本的載體, 其含量的變 化直接關(guān)系到各器官的能量代謝。ATP 作為zui重要的能量分子在細(xì)胞的各種生理、病理過(guò)程中起著 重要作用。ATP 水平的改變，會(huì)影響許多細(xì)胞的功能。通常細(xì)胞在凋亡、壞死或處于一些毒性狀態(tài) 下，ATP 水平會(huì)下降，而高葡萄糖刺激等對(duì)于一些細(xì)胞可以上調(diào)細(xì)胞內(nèi) ATP 水平。通常 ATP 水平 的下降表明線粒體的功能受損或下降，在細(xì)胞凋亡時(shí) ATP 水平的下降通常和線粒體的膜電位下降同 時(shí)發(fā)生狀態(tài)。ATP 含量測(cè)定試劑盒可以用于檢測(cè)紅細(xì)胞或組織內(nèi)的 ATP 水平。

分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、臺(tái)式離心機(jī)、研缽和蒸餾水。

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一、樣本前處理：

1、紅細(xì)胞：抗凝全血取下層積壓紅細(xì)胞，一般按 1:4 的體積比加雙蒸水進(jìn)行稀釋，再混勻使溶血*，制備成溶血液。將制好的溶血液加入玻璃試管中沸水加熱煮 10 分鐘，取出混勻抽提 1 分鐘， 4000 轉(zhuǎn)/分鐘，離心 10 分鐘，取上清液待測(cè)。

2、組織樣本：準(zhǔn)確稱取組織重，按質(zhì)量（g）：體積(mL)為 1：9 的比例加入 9 倍體積的沸雙蒸水， 制成 10%的勻漿液，再置于沸水中煮 10min，取出混勻抽提 1min，3500 轉(zhuǎn)/分鐘，離心 10min， 取上清液待測(cè)。

3、培養(yǎng)細(xì)胞：先離心處理將細(xì)胞核培養(yǎng)上清分離，棄上清，得到下層沉淀細(xì)胞（一般細(xì)胞數(shù)量達(dá) 到 106 個(gè)），將收集好的細(xì)胞加入 300-500μL 的熱雙蒸水，置于熱水浴（90-100℃）中勻漿破碎 后，將細(xì)胞懸液于沸水浴中加熱 10min，取出混勻抽提 1min（渦旋混勻），即可用于測(cè)定。（如 果存在大塊細(xì)胞碎片，需離心后取上清測(cè)定） 

注意：

1.要求不能有任何磷污染，建議用一次性塑料試管。

2.顯色應(yīng)用液配好后，不可放置太久，一般可保存 5 天，現(xiàn)配現(xiàn)用。

3.組織勻漿宜用 2%-5%濃度的勻漿上清，若樣本濃度過(guò)高，則底色過(guò)深（對(duì)照管 OD 過(guò)高），需稀釋 測(cè)定，一般通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)將對(duì)照 OD 值控制在 1.0 以下。

三磷酸腺苷?ATP含量測(cè)定試劑盒真的太棒了！